Segestria florentina, es la araña europea más grande de la familia Segestriidae. El cuerpo de las hembras (sin considerar las patas) mide 13-22 mm, mientras que los machos miden 10-14 mm. Se caracterizan por sus llamativos quelíceros de color verde tornasolado, siendo esto más evidente en las hembras que en los machos. La coloración del prosoma y las patas oscila entre castaño oscuro y negro, el opistosoma (abdomen) es más claro y dorsalmente presenta una franja longitudinal oscura formada por manchas triangulares contiguas. En algunas hembras todo el abdomen se torna casi negro y estas manchas son menos evidentes.

Son cazadores por emboscada. Tejen telarañas con forma de embudo en grietas y huecos presentes en el entorno, ya sea en construcciones humanas como muros, escombros o en la corteza de los árboles. Cuando un insecto u otro invertebrado entra en contacto con dichas telas genera vibraciones en los hilos que indican a la araña de la presencia de una presa en las cercanías. Dicho estímulo desencadena que el arácnido salga velozmente para atacar y paralizar a su presa con su veneno. Los invertebrados capturados son luego transportadas al interior del embudo donde posteriormente serán consumidos.

Son depredadoras que se alimentan de otros invertebrados terrestres, principalmente insectos como dípteros, coleópteros, hemípteros, dermápteros e himenópteros.

Si bien no reviste peligrosidad, tiene un carácter nervioso y tiende a morder al ser manipulada, provoca dolor local por algunas horas y en algunos casos malestar general. En estudios de la composición química de su veneno se aislaron entre otros componentes 2 de acción neurotóxica y 1 de acción insecticida